雙電子束調動熒光(TPEF)光學電子顯微鏡,也被視為雙電子束光學電子顯微鏡,是對活體企業潛層三維空間三維成像的方法。深入顯像是TPEF高倍顯微鏡觀察觀察當下的的特色,它施用了更長的鼓勵由此可見光吸光度(常常是近紅外股票波段),以致其所帶來的散射比傳統的共集聚高倍顯微鏡觀察觀察下列施用的較短的由此可見由此可見光吸光度越來越少。更長的由此可見光吸光度同一時間也減掉了發源反射光的圖片背景照明燈,并延長了在更高的深入處的評測度。迄今為止,用TPEF高倍顯微鏡觀察觀察是可以獲取1mm深入的人體內人的大腦圖形。
圖1:FCH 寬光譜分析光纖傳輸飛秒脈沖發生器激光器,主波長區間950-115nm,脈沖發生器長度15fs, 谷值電率>200kW
圖2:黃色線:SCH 飛秒脈沖激光手術器光譜儀分析儀弧線;黃色線:1umk線百秒脈沖激光手術器光譜儀分析儀弧線;深灰色線:網紅熒光淀粉酶DsRed吸取載面光譜儀分析儀
一、高的刺激速率,高的影像亮度對比度
說法上,在雙二氧化碳離子束機器手術器顯微鏡觀察中,數字圖像的色度與抑制生產率真接有關的,而抑制生產率*根據于二氧化碳離子束機器手術器通量和熒光團的二階非線型抑制斷面(GM) 。最為一款舉例,我會試著折算熒光淀粉酶mRFP在15fs二氧化碳離子束機器手術器脈寬(如SCH飛秒二氧化碳離子束機器手術器器)和1050nm中吸光度燈照下的抑制生產率。與100fs的二氧化碳離子束機器手術器器相較,15fs二氧化碳離子束機器手術器器械有更寬的帶寬的配置(達200nm),會在900到1200nm相互之間抑制mRFP,與100fs二氧化碳離子束機器手術器器的11nm相較,這只是一款更寬的光譜儀城市。圖3:黃色的身材等值線:以1050nm為平臺的SCH 15fs全金屬飛秒金屬智能機械器的基線工作效率; 黃色的身材等值線:以1050nm為平臺的100fs金屬飛秒智能機械器的基線工作效率;自然黑色的身材等值線:mRFP的二階非線型激發橫截面(GM)
圖4:顏色直線方程:SCH 15fs全金屬飛秒金屬二氧化碳離子束器的閥值馬力; 黃色直線方程:100fs金屬飛秒二氧化碳離子束器的閥值馬力;青色直線方程:mRFP的二階非線形激勵機制斷面(GM)
圖5:小鼠可以使腸胃薄片的2P熒光顯微鏡數字圖像,用SYTOX Green標出癌細胞質(藍顏色)和Alexa Fluor 568煥鈦標出肌動蛋清絲(藍顏色)
二、多色直接激勵
幻想下,并且機光散斑若干光波超區域的熒光團,而不可了解取舍最加引起起光譜分析分析圖的機光器。在雙電子束光學顯微鏡中,施用中國傳統的100fs引起起機光器,這一般是是一個個繁瑣的,有時候甚至于是不能有機會到位的重任。傅里葉更換限制的100fs近紅外氣體飛秒機光器(比如說鈦輝石飛秒機光器、920nm光纖線飛秒機光器)的光譜分析分析圖間距一般是在10~20nm超區域內,其只會并且引起起引起起光譜分析分析圖在10~20nm光譜分析分析圖超區域內的熒光團。因而,若想要用單臺機光器去并且引起起太多貨品的熒光團就須要資源帶寬更寬,智能更短的機光器。圖5:熟悉熒光測試探針增強光的波長
圖6:小鼠胃腸道的雙電子束熒光顯微鏡形象
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