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無需掃描! SPINDLE可實現3D高精度單分子定位成像!

更新時間:2022-08-01 點擊次數:1388
不同打印! SPINDLE可保證3D高精密度單團伙市場定位三維成像!


講解


超分別率顯微顯像就是一系統還可能使科學研究人工還可能“突破"光學反應體視電子顯微鏡觀察衍射障礙性的方案,在該系統方案中別率高的水平為光刺激啟動品牌準確產品位置顯微水平(PALM)。等方案依懶于在數萬幀中對1個原子的重復子集實行品牌準確產品位置(SMLM),并將等個體經濟的品牌準確產品位置相空間為1個超分別率圖像文件。中國過去的品牌準確產品位置體視電子顯微鏡觀察可能在豎向基本要素上實行10~20nm的明確顯像,要改變更為重要的品牌準確產品位置精密度較,需要體視電子顯微鏡觀察運行環境還具有更為重要信噪比的流暢檢測器。其實豎向分別率這令想象深切,但中國過去的2D SMLM仍基本由于缺乏心軸分別率。


新西蘭Double Helix Optics公司的的SPINDLER系類3D高倍顯微鏡觀察成相信息模塊與3DTRAXR小軟件相配合,可在二維尺度大上推動高gps精度、亞衍射終極精確定位,并具括展的進一步成相程度。SPINDLE選取精密五金模具磁學元器件裝修設計,可與市表面上上在售的生物學高倍顯微鏡觀察無縫對接結合,并打造qian 所wei 有的橫截面和軸上精密五金模具成相組合成。用戶名可可根據為重要的用選用適合自己的相位掩免費模板以推動依據進一步區域、發射衛星主波長和信噪比等參數設置對點對外擴散數學函數(PSF)的優化程序,更為重要的是,SPINDLE可在必須復印的實際情況放到多張圖象軍委委員傳統意義成相程序的景深增加10倍。


在本詩中,自己展出了要怎樣將SPINDLE激光散斑模式與傳統的熒光顯微鏡觀察整合在使用以在各種多個多維度(x、y、z)上確保亞衍射加速度激光散斑。SPINDLE可與其中高產品量的數學攝像頭兼容,而是是emccd還是要scmos都行以打造位置顯微鏡觀察需要的高信噪比畫像。


施用SPINDLE和DH-PSF相位掩范例對神經元微管參與三維空間超分別成相


在中間句中,.我認定書了操作SPINDLE單節點模塊圖片就可滿足高gps精密度較、大深層次.的超鑒別率恢復。如圖是1圖示,操作Double Helix (DH-PSF) 的相位掩范例與SPINDLE單團伙市場定位裝置高倍顯微鏡構件組合。裝置將單獨某個團伙發出了的光分紅幾個光瓣,順利通過找幾個光瓣的中間來搜索出現發亮點的縱向(x-y)地點;兩光瓣區間內的多角度商品編碼了出現發亮點的心軸(z)地點。這個加倍的資訊將可在縱向和心軸尺寸上異常高的gps精密度較(<20nm)通過超鑒別率恢復。除此之外,SPINDLE映射了團伙就可市場定位裝置的景深,這一靈敏度度和映射深層次.激光散斑的組合可以更顯升高的z軸鑒別率以收集整理比較多的資料。


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圖1:通過單原子品牌定位顯微三維成像的新技術(SMLM)的新技術的中有可對換相位掩模支撐架的SPINDLE控制器


從而講解SPINDLE的工做原則,各位適用NikonN-STORM電子顯微鏡結合起來Photometrics Prime 95B書籍對被AlexaFluor 647偶聯微管蛋白酶免疫抗體標簽的Cos7血細胞去了成相。這對該樣機,各位適用經系統優化的相位掩免費模板,該掩免費模板可與遠紅外主波長染色劑和1.49 NA的100倍物鏡配合適用。樣機在640 nm脈沖光間斷作用傳到Prime95B上成相,曝光度時間間隔為30 ms。適用3DTRAX工具對單放射點去準確定位,并將可是導到到ImageJae插件Thun-der STORM。適用歸一化高斯的方法改建圖形,并適用ImageJ檢查表“Spectrum"以的顏色對z高度去商品編碼。


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圖2:1個100nm珠在Prime95B上用SPINDLE在焦水平線(0µm)和焦水平線上面(+1µm)和右上角(-1µm)納米處的影像圖


改造的但是包括小于200萬個產品定位,并表明Cos7癌人體細胞中微管的30µmx30µm視覺空間、層次小于2.1µm的標準(圖3左)。層次以有顏色代碼,癌人體細胞側面為大紅色/深紫色,上方附近商場為紫色/橘黃色。圖像放大的插畫表明微管在千萬層次標準內的了極好的改造(圖3,右)。某些信息凸顯了選用Double Helix SPINDLE電源模塊面臨的延伸景深顯像和高橫著和支承判斷率。


安全使用Double Helix 3DTRAXpc軟件開始高測微儀二維定位手機


Double Helix 3DTRAXPC軟件都是個ImageJ/FIJI瀏覽器插件,其會在橫面和徑向以亞衍射程度準確度精準精準產品定位單獨大大分子。3DTRAX還的使用克拉重美-拉奧最低值(CRLB)5求算了各個精準精準產品定位大大分子的準確度值。該求算立于各個精準精準產品定位的信噪比。


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圖3:采用SPINDLE(R)和Prime 95B影像的微管三維圖超判定率從建圖。左圖:Cos7體細胞抗體染料的微管蛋白酶,字體顏色識別碼長度。右圖:左邊畫面的調小位置,表現了長度已經超過22um的微管。圖片文字由Double Helix Optics提高。均衡CRLB值橫項約10nm,載荷約20nm(圖3)


概述


Double Helix的SPINDLE超判別率3D顯微影像模組、相位掩模和3DTRAX軟件下載的搭配可達到高精密等級大深度13D影像、跟蹤目標和篩選。此為選用中,當我們在亞體人體癌細胞成分的的3D超判別率整修中展示出了大至10nm的橫排誤差等級和20nm的徑向誤差等級。SPINDLE系貨品為科學研究工人能提供了強勁的的工具集,可使得對廣生物體系統軟件中分頭子成分的、亞體人體癌細胞和體人體癌細胞內共同功用的領悟。


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圖4:雙重和支承精密度。適用從建圖2如圖數字圖像的準確定位系統精密度值。精密度值由3DTRAX手機app依據其信噪比食用每家反射器的Cramer-Rao下界5算起查出。準確定位系統數顯壓力表示在y軸上,精密度值(nm)表示在x軸上


相關的專著;

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關與Double Helix Optics

美利堅Double Helix Optics是家靠近美利堅科羅拉多州博爾德的計算的光學用料大公司。Double Helix Optics使用其zhuan利的雙旋轉光過程中成相技術裝修設計的開發下一批高精確3D成相物料,常見技術應用在一生物理學和用料物理學教育領域以改變對亞體細胞結構類型3D的成相、跟蹤定位和記數。Double Helix的SPINDLE款型激光散斑功能模塊與可設置的相位掩模庫、在算新建和剖析的app軟件相相輔相成,為了保證為當我們的企業客戶簡述操作的詳細癥狀帶來優質化量的3D激光散斑的技術。


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