HiCAM高像資料熒光單反中用斑馬魚心肌的高活體三維成像技能
在瑞士巴德諾海姆的Max Planck心肺研究分析方案所,人對斑馬魚的精力管控制程序來了研究分析方案。斑馬魚的透明色度(圖1)還有實驗優缺點使其成了我們身體精力管控制程序的志向比列模式。
圖1 斑馬魚的照片圖片。心臟,十分重要是在灰色方塊內
只為研究分析斑馬魚的血液循環系統進出,猩紅癌癌細胞被熒光核蛋白酶DsRed標志。熒光的比的強度受支承在紅癌癌細胞上的熒光核蛋白酶次數的限定。于此,燈光放出的方向上是隨機性的,這進步減掉了滿足手機拍照的光量。低光比的強度是不程度產生現象,增高曝光過度時期來捕獲已經可以的僅一款較為常用的搞定方式 ,這一般性被用在成相固定的的昏暗物件。而是,在中移動物件上的使用同樣的方式 會致使圖形看不清。
你會發現一種活的斑馬魚,它的臟器是在抖動的。斑馬魚的心率約為每min175次,或更加接近每秒3次。由于吸附心跳的每次階段性,是需要較高的幀率,一旦圖片會受到活動不清楚而失幀。這寓意著圖片調節器器很匆忙地裸漏在昏暗的熒光燈下。可以通過增大抑制光的強度來增大熒光燈的數量統計不可行性的,由于這會危害魚種。
圖2 HiCAM高速度像提升熒光照像機附在熒光顯微鏡上
工作配置
用安裝程序有Lambert HiCAM高速收費站攝錄設計的熒光顯微鏡對斑馬魚完成調查(圖2)。將魚穩固在疑膠中,從左下角直射。DsRed淀粉酶的熒光從紅血球核中發布。這些光向每一個目標衛星發射,進來其他光以相等的目標完成繳光的激光切割機的光路。雖然,熒光完成二色鏡被方向到單反相機上,而也不是被漫漫反射回照明。隨便散射的刺激光都被二色鏡漫漫反射。濾光片將除掉隨便視頻背景光,只電子散射紅血球核熒光發布可見光波長的光。
畫像感知器將吸引打不進的熒光。吸引將以每秒千余或數萬幀的幀率下采取,每幀的爆光時光總數級在幾毫秒到幾毫秒的有些有些。光電子培增ccd (emccd)感知器的光敏感度不足以吸引到變弱的熒光。但鳥卵在全判斷率下只要保持共要100fps的幀率,這談談迄今為止的APP說都是不夠的。而cmos感知器也可以在更好的幀率下工做,在全判斷率下會達每秒數萬幀。其實,在每幀較短的爆光時光內,平常的繞城高速CMOS感知器難以見證足夠了的光量來可達到適宜的信噪比。
圖3 斑馬魚心房中(圖相右下方角)的紅血細胞從一款 腔室被傳送到下一款 腔室(1-3),相結入會去主動脈(5)。這里的展示的圖相是在時候25毫秒的情形下統計的。用500us的曝出時候以2000 fps的幀率去統計。
HiCAM速度像增進熒光照像機的顯著優點
HiCAM迅速像資料熒光照相機通過將高速CMOS傳感器與圖像增強器相結合,實現了所需的光靈敏度和高幀率。圖像增強器將檢測到的光子數量提高了幾個數量級。這樣,就可以以每秒2000幀的速度記錄斑馬魚的血液流動。圖3顯示了斑馬魚心血管系統中紅細胞的流動情況。
HiCAM繞城高速像不斷增強熒光照機-高靈敏度,幀頻可達4000幀/秒,實時熒光顯微成像的理想選擇!
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